Content
- Diferència principal
- South Blotting vs. Western Blotting
- Gràfic de comparació
- Què és Southern Blotting?
- Què és Western Blotting?
- Diferències claus
- Conclusió
Diferència principal
La diferència principal entre Southern Blotting i Western Blotting és que Southern Blotting és una tècnica que s’utilitza per detectar un fragment d’ADN específic en una mostra determinada mentre que Western Blotting s’utilitza per esbrinar una proteïna específica en una mostra determinada.
South Blotting vs. Western Blotting
Blotting és una tècnica que fan servir els científics per separar diferents tipus de molècules d’una barreja o mostra. En aquesta tècnica, macromolècules com els àcids nucleics (ADN i ARN) i les proteïnes d'una barreja es mouen per una llosa de gel. Aquí, les partícules minúscules es mouran més ràpidament que les grans. Aquestes molècules es pressionen contra la superfície d'una membrana immobilitzada que transfereix les molècules a la membrana. Hi ha diferents tipus de tacte basant-se en la detecció de material específic, és a dir, la tacte sud, la tacte nord, i la taquilla occidental. Southern blotting és el tipus de tacte que s’utilitza per detectar ADN mentre que la Western blot s’utilitza per esbrinar proteïnes. Southern Blotting va ser desenvolupat per Edward M. Southern el 1975. Així doncs, es coneix com a Southern blotting. D'altra banda, el western blotting va ser desenvolupat pel grup de George Stark a la Universitat de Stanford el 1979. Aquest nom s'utilitzava per combinar amb el sud de la taquilla. Southern blotting s'utilitza per esbrinar una seqüència d'ADN específica, mentre que, western blotting s'utilitza per esbrinar un aminoàcid o una seqüència proteica específica.
Gràfic de comparació
| South Blotting | Western Blotting |
| Una tècnica que s'utilitza per esbrinar una seqüència d'ADN específica en una barreja determinada és coneguda com south blot. | Una tècnica que s’utilitza per esbrinar una seqüència d’aminoàcids específic de la proteïna en una barreja determinada és coneguda com a South Blotting. |
| Desenvolupat per | |
| Southern blotting va ser desenvolupat per Edward M. Southern el 1975. | Western blotting va ser desenvolupat pel grup de George Stark a la Universitat de Stanford el 1979. |
| Tipus de detecció | |
| Southern blotting s'utilitza per esbrinar una seqüència d'ADN específica. | Western blotting s'utilitza per esbrinar un aminoàcid o una seqüència proteica específica. |
| Principi | |
| Funciona en el principi d’hibridació. | Funciona en el principi del mètode d’immunodetecció o la interacció antigen-anticossos. |
| Sonda | |
| S’utilitza com a sonda un ADN monocatenari o de vegades ARN. | Els anticossos primaris i secundaris s’utilitzen com a sonda. |
| Electroforesi en gel | |
| L’electroforesi en gel d’agarosa s’utilitza en la filtració del sud. | SDS PAGE / Gel de poliacrilamida que s'utilitza per separar les proteïnes en l'aplicació occidental |
| Procediment per blanqueig | |
| Southern blotting segueix el procediment de transferència capil·lar. | Western Blotting segueix el procediment de transferència elèctrica. |
| Mostra | |
| Durant la filtració del sud, la mostra ha de desnaturalitzar-se. | Durant la taquilla occidental, la mostra hauria d'estar en el seu estat natal. |
| Bloqueig | |
| No es tracta de cap pas com el bloqueig en la detecció del sud. | Durant la filtració occidental, els llocs d’anticossos inespecífics es bloquegen al paper de nitrocel·lulosa amb l’ajut de llet en pols o d’albúmina sèrica bovina (BSA). |
| Mètodes d'etiquetatge | |
| Els mètodes habituals d’etiquetatge que s’utilitzen en la tala meridional són l’ús de colorants cromogènics o d’etiquetatge radiomarcat o fluorescent, etc. | Els mètodes d’etiquetatge utilitzats en Western Blotting són l’ús d’anticossos marcats fluorescentment o radiomarcatge, colorants cromogènics o formació de diaminobenzidina, etc. |
| Mètodes de detecció | |
| La detecció de la llum, l’autoradiògraf i els canvis de color s’utilitzen com a mètodes de detecció en la tacte del sud. | Els mètodes de detecció en western blotting són canvis de color i detecció de llum etc. |
| Aplicació | |
| Southern blotting s'utilitza en la detecció d'ADN, proves de paternitat, digitació d'ADN, per a la identificació de víctimes, per identificar criminals, per trobar agents infecciosos i per identificar mutació o reordenació gènica, etc. | Western blotting s’utilitza per trobar el nombre de proteïnes d’una barreja, per detectar la presència de VIH, virus i bacteris, etc. en el sèrum, per trobar proteïnes defectuoses i s’utilitza com a mesura definitiva per a l’herpes, l’hepatitis B, Lyme. malaltia, i la malaltia de Creutzfeldt-Jacob, etc. |
Què és Southern Blotting?
Southern blotting és el mètode de blotting més antic que va ser donat per Edwin Southern amb el nom de south blotting. S'utilitza per esbrinar una seqüència específica d'ADN en una mostra o barreja determinada. Els passos implicats durant la suposició meridional són l’electroforesi, la transferència i la detecció de seqüències específiques. En primer lloc, l’ADN es fragmenta amb l’ajut d’un enzim de restricció específic. A continuació, els fragments d'ADN desitjats es separen mitjançant l'electroforesi en gel. Aquests fragments es desnaturalitzen amb l’ajuda d’una solució alcalina, per exemple, NaOH, etc. per separar les dues cadenes d’ADN. Aquests fragments d’ADN monocatenari es van transferir després a una membrana mitjançant el procés de tacte. Aquest ADN unit a una membrana es tracta llavors amb una sonda marcada. Aquesta sonda s'unirà a la seva cadena complementària en l'ADN de la membrana que es pot visualitzar mitjançant autoradiograma, etc.
Què és Western Blotting?
El grup de George Stark es va inventar el mètode Western Blotting a la Universitat de Stanford que s'utilitza per identificar una seqüència específica d'aminoàcids de la proteïna. També es coneix com a protecció o proteïna. Els passos durant la taquilla occidental són l’electroforesi, la transferència i la detecció de proteïnes específiques. En primer lloc, homogeneïtzar la barreja. A continuació, separeu la molècula d’interès amb l’ajuda de l’electroforesi. Transferiu aquestes molècules a la membrana i identifiqueu la proteïna específica mitjançant una sonda específica.
Diferències claus
- Una tècnica que s’utilitza per esbrinar una seqüència d’ADN específica en una barreja determinada és coneguda com south blotting, mentre que, una tècnica que s’utilitza per esbrinar una seqüència d’aminoàcids específic de la proteïna en una barreja determinada es coneix com a South Blotting.
- Southern Blotting va ser desenvolupat per Edward M. Southern el 1975, conegut com a South Blotting. D'altra banda, el western blotting va ser desenvolupat pel grup de George Stark a la Universitat de Stanford el 1979.
- Southern blotting s'utilitza per esbrinar una seqüència d'ADN específica. Per la seva banda, la Western Blotting s'utilitza per esbrinar un aminoàcid o una seqüència proteica específica.
- Southern blotting funciona en el principi de la hibridació a la cara; western blotting funciona en el principi del mètode d’immunodetecció o la interacció antigen-anticossos.
- S'utilitza un ADN monocatenari o de vegades ARN com a sonda en Southern Blotting per l'altre costat, en Western blotting anticossos primaris i secundaris s'utilitzen com a sonda.
- L’electroforesi en gel d’agarosa s’utilitza en la suposició meridional mentre que el SDS PAGE / Gel de poliacrilamida s’utilitza per separar proteïnes en les taques occidentals.
- El Southotot segueix el procediment de transferència capil·lar, d'altra banda; western Blotting segueix el procediment de transferència elèctrica.
- Durant la tacte sud, la mostra ha de desnaturalitzar-se, mentre que, durant la taquilla occidental, la mostra hauria d'estar en el seu estat natal.
- No es fa cap pas com el bloqueig en la detecció del sud del costat del volat, durant la Western Totting, els llocs d’anticossos inespecífics es bloquegen al paper de nitrocel·lulosa amb l’ajut de la llet en pols o l’albúmina sèrica bovina (BSA).
- Els mètodes habituals d’etiquetatge que s’utilitzen en la tala del sud són l’ús de colorants cromogènics o d’etiquetatge radiomarcat o fluorescent, etc., mentre que, els mètodes d’etiquetatge utilitzats en Western Blotting són l’ús d’anticossos marcats fluorescentment o radiomarcat, colorants cromogènics o formació de diaminobenzidina, etc.
- La detecció de la llum, l’autoradiògraf i els canvis de color s’utilitzen com a mètodes de detecció a la taquilla del sud, mentre que, els mètodes de detecció de la taquilla occidental són canvis de color i detecció de llum, etc.
- Southern blotting s'utilitza en la detecció d'ADN, proves de paternitat, digitació d'ADN, per a la identificació de víctimes, per identificar criminals, per trobar agents infecciosos i per identificar mutació o reordenació de gènics, etc. barreja, per detectar la presència de VIH, virus i bacteris, etc. en el sèrum, per descobrir proteïnes defectuoses i utilitzada com a mesura definitiva per a l’herpes, l’hepatitis B, la malaltia de Lyme i la malaltia de Creutzfeldt-Jacob, etc.
Conclusió
A la discussió anterior es resumeix que la tacte meridional és la tècnica de detecció més antiga usada per esbrinar el segment d'ADN específic en una mostra, mentre que es va descobrir la Western blot i es va utilitzar per identificar una seqüència específica d'aminoàcids o una proteïna específica.
